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    微生物實(shí)驗室基本要求

     1.辦公室


    實(shí)驗室的辦公室是檢驗工作人員辦公、信息查詢(xún)和實(shí)驗室管理工作的地方,其面積應在20m2左右(可根據人員數量進(jìn)行調整),通風(fēng)采光好,內設基本的辦公桌、椅、電腦、打印機、存放資料和留樣的柜等。檢驗工作人員可以在辦公室里登記待檢驗的樣品、出檢驗報告和處理有關(guān)的文件資料等,也可供工作人員在工作過(guò)程中放松休息,以便更清醒地思考、分析和解決問(wèn)題,極大地提高工作效率。


    2.準備室


    準備室用于配制培養基、藥品和樣品處理等。主要設備有藥品柜、存放器具或材料的專(zhuān)柜、實(shí)驗臺。實(shí)驗臺材料應以耐熱、耐酸、耐堿為宜。邊臺上放置電爐,藥品柜可分門(mén)別類(lèi)地存放一些一般藥品及試劑。易揮發(fā)刺激性氣味或有害氣體藥品應在通風(fēng)櫥中使用。冰箱用于儲存需冷藏的實(shí)驗樣品、藥品或試劑。各種玻璃器皿(如試管、燒杯、容量瓶、試劑瓶、錐形瓶、玻璃棒)可分類(lèi)放置。室內需設有多處水龍頭、下水道、電源插座。準備室應設有水電總控制閥。


    3.洗滌室


    洗滌室主要用于洗刷器皿。由于使用過(guò)的器皿已被微生物污染.有時(shí)還會(huì )存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,**好設置洗滌室。洗滌室應設有洗滌區、制水區。室內應備有加熱器、蒸鍋、超聲波清潔器,及洗刷器皿用的盆、桶等,回收用的廢物缸、廢液缸。還應有各種瓶刷、玻璃珠、試管架、晾干架、洗瓶、噴壺、洗滌劑(去污粉、肥皂、洗衣粉、洗潔精)、消毒液(新潔爾滅、酒精、次氯酸、過(guò)氧乙酸)。


    4.滅菌室


    滅菌室是培養基及有關(guān)的檢驗材料滅菌的場(chǎng)所。滅菌設備是高壓設備,具有一定的危險性.所以滅菌室應與辦公室保持一定距離以保證安全,使用時(shí)應有專(zhuān)人操作.但也要方便工作,通常設在通用實(shí)驗室附近并與之保持一定距離(如隔一條走廊的距離或小房間的距離).以減少影響。滅菌室內安裝有滅菌鍋等滅菌設備。另外,滅菌室里應水電齊備并有防火措施和設備,人員要遵守安全操作制度。滅菌室主要用于培養基、各種器具及使用后被污染的物品的滅菌,室內應備有高壓蒸汽滅菌器、干熱滅菌烘箱滅菌設備。一般產(chǎn)品分裝**包裝容器后再滅菌,也可選用過(guò)濾除菌法達到無(wú)菌保證要求。氣體滅菌法是在充有滅菌氣體的高壓腔室內進(jìn)行。滅菌室中應備有化學(xué)殺菌劑,如重金屬離子、某些強氧化劑、抗生素。


    5.更衣室


    更衣室是進(jìn)行微生物檢驗時(shí)進(jìn)入無(wú)菌室之前工作人員更衣、洗手的地方,室內設置無(wú)菌室及緩沖室的電源控制開(kāi)關(guān)和放置無(wú)菌操作時(shí)穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。有時(shí)還設有裝有鼓風(fēng)機的小型房間,其作用是減少工作人員帶人的雜菌,但相應其成本也很高。


    6.緩沖室


    緩沖室是進(jìn)入無(wú)菌室之前所經(jīng)過(guò)的房間,安裝有鼓風(fēng)機,以減少操作人員進(jìn)人無(wú)菌室時(shí)的污染.保證實(shí)驗結果的準確性。進(jìn)口和出口通常是呈對角線(xiàn)位置,以減少空氣直接對流造成的污染。要求比較高的微生物檢驗項目如致病菌的檢驗,應設有多個(gè)緩沖室。


    7.無(wú)菌室


    無(wú)菌室也稱(chēng)接種室,是系統接種、純化菌種和微生物檢驗過(guò)程等無(wú)菌操作的專(zhuān)用實(shí)驗室。在微生物檢驗工作中,菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的特點(diǎn)就是要保證菌種為純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對接種工作干擾很大。因此,接種工作要在空氣經(jīng)過(guò)滅菌的環(huán)境里進(jìn)行,小規模的可利用超凈工作臺.大規模的則在無(wú)菌室里操作。無(wú)菌室是用于無(wú)菌操作的場(chǎng)所,要求密封、清潔.安裝紫外燈和空調設備(帶過(guò)濾設備)及傳遞物品用的傳遞小窗,傳遞小窗應向緩沖室內開(kāi)口以減少污染和方便工作。另外.無(wú)菌室內還應配備超凈工作臺和普通工作臺。有條件的實(shí)驗室可設置生物安全柜。


    無(wú)菌室設置及使用的正確與否直接影響了項目檢驗的成?。覀冊谶@里對無(wú)菌室進(jìn)行重點(diǎn)介紹。


    (1)無(wú)菌室的設置


    無(wú)菌室應根據既經(jīng)濟又科學(xué)的原則來(lái)設置。其基本要求有以下幾點(diǎn):


    ①無(wú)菌室應有內、外兩間.內問(wèn)是無(wú)菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過(guò)大,以便于空氣滅菌。內間面積2m×2.5m—5m2,外間面積1m×2m=2m2,高以2.5m以下為宜,都應設有天花板。墻壁與地面和天花板連接處無(wú)縫隙,不留死角。無(wú)菌室六面光滑平整,能耐受清洗消毒。


    ②內間應當設拉門(mén),以減少空氣的波動(dòng).門(mén)應設在離工作臺**遠的位置;外問(wèn)的門(mén)**好也用拉門(mén),門(mén)縫要封緊,兩門(mén)應錯開(kāi).以免空氣對流造成污染。外間的門(mén)要設在距內間**遠的位置。


    ③在分隔內間與外間的墻壁或“隔窗”上.應開(kāi)一個(gè)小窗.作接種過(guò)程中必要的內外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內問(wèn)的次數,降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內外都掛對拉的窗扇。


    ④無(wú)菌室容積小而嚴密,使用一段時(shí)間后,室內溫度很高,故應沒(méi)置通氣窗。通氣窗應設在內室進(jìn)門(mén)處的頂棚上(即離工作臺**遠的位置).**好為雙層結構,外層為百葉窗,內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開(kāi)啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫設備。


    (2)無(wú)菌室內設備和用具


    ①無(wú)菌室內的工作臺,不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺面水平。光滑是便于用消毒藥劑擦洗,水平是在倒瓊脂平板時(shí)可以保證培養皿內平板的厚度一致。


    ②在內室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內室的紫外燈應安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外燈可安裝在外室中央。


    ③外室應有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來(lái)蘇爾水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。


    ④內室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀(剪、鑷子)、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。


    ⑤試管、培養皿、槍頭、錐形瓶、EP管等器皿和培養基均可用高壓蒸汽滅菌器滅菌:shou先將待滅菌的器皿或培養基分裝好,用報紙包裹嚴實(shí).通過(guò)棉線(xiàn)捆扎牢固,避免空氣污染。檢查滅菌器中蒸餾水量是否充足,檢查每個(gè)閥門(mén)及開(kāi)關(guān)是否工作正常,然后將待滅菌的物品放入高壓蒸汽滅菌鍋.打開(kāi)電源.調制溫度和時(shí)間。干熱滅菌箱可用于制藥行業(yè)的西林瓶、安瓿瓶、鋁蓋、金屬及玻璃器皿件滅菌去熱原和固體物料干燥滅菌。


    8.恒溫培養室


    每一類(lèi)微生物生長(cháng)所需的溫度范圍各不相同,且各有其**適溫度。如果溫度較低,則微生物代謝低下,生長(cháng)緩慢。如果溫度適宜,則微生物代謝旺盛,生長(cháng)快。如果溫度太高,則會(huì )因為高溫導致蛋白質(zhì)變性,使酶失去活力而抑制生長(cháng),甚**引起死亡。恒溫培養室就是對接種微生物提供恒定適宜溫度進(jìn)行培養的場(chǎng)所。


    (1)培養室的設置


    ①培養室應有內、外兩間,內室是培養室,外室是緩沖室。房間容積不宜太大.以利于空氣滅菌.內室面積在3.2m×4.4m=14m2左右,外室面積在3.2m×1.8m=6m2左右,高以2.5m左右為宜,都應有天花板。


    ②分隔內室與外室的墻壁上部應設帶空氣過(guò)濾裝置的通風(fēng)口,使內室有良好的空氣供應,以滿(mǎn)足好氧微生物對氧的需要。


    ③為滿(mǎn)足微生物對溫度的需要.需安裝恒溫恒濕機。恒溫恒濕機的主機部分應安裝在內室以外。


    ④內外室都應在室中央安裝紫外燈,以供滅菌用。


    (2)培養室內設備及用具


    ①內室通常配備培養架和搖瓶機(搖床)。常用的搖瓶機有旋轉式、往復式兩種。


    ②外室應有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。


    ③培養室的滅菌、消毒。同無(wú)菌室的滅菌、消毒措施。小規模的培養可不啟用恒溫培養室,而在恒溫培養箱中進(jìn)行。


    9.通用實(shí)驗室


    通用實(shí)驗室是進(jìn)行微生物檢驗準備工作和非無(wú)菌操作實(shí)驗時(shí)使用,也可供進(jìn)行微生物的觀(guān)察、計數和生理生化測定及科研工作使用。室內的陳設因工作側重點(diǎn)不同而有很大的差異。一般均配備實(shí)驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗臺要求平整、光滑,實(shí)驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。通用實(shí)驗室應設有較大的長(cháng)方形工作臺作為實(shí)驗操作臺,臺下設計了各專(zhuān)用儀器柜,臺面用石板加塑膠墊等不易腐蝕和穩固耐用的材料設置,并設有專(zhuān)用擱物架。另外,還應設置一個(gè)適當大小的通風(fēng)櫥,內配有排氣系統和安裝給排水系統,如水槽及水槽上的各種水龍頭。實(shí)驗室的地面設計為水磨石地面,這樣容易清潔,不易積水,方便工作。實(shí)驗室應有良好的通風(fēng)照明設備和消防設施。通用實(shí)驗室為了方便實(shí)驗工作的開(kāi)展,通常配備了常用的儀器(分光光度計、pH計、烘箱、電爐等)及常用的各種玻璃器皿和常用的各種化學(xué)試劑、藥品。此外,還應配有清潔用工具和工作服。如果工廠(chǎng)條件許可.檢驗人員可以根據分工各自擁有專(zhuān)用的實(shí)驗工作臺或工作地方,以快速、高效完成檢驗任務(wù)。


    教學(xué)用的微生物實(shí)驗室,通常按80m2/40人設計,**好是長(cháng)方形,應設置講臺、黑板、實(shí)驗桌。實(shí)驗桌上配有藥品架,在藥品架的適當高度安裝日光燈.作為觀(guān)察微生物時(shí)的光源。


    10.實(shí)驗室其他要求


    總的來(lái)說(shuō),在非專(zhuān)業(yè)化實(shí)驗或條件有限時(shí),準備室、洗滌室、通用實(shí)驗室的劃分并不十分明確.甚**合而為一。在專(zhuān)業(yè)化研究或條件允許的情況下,上述九室**好都單獨設置。


    微生物實(shí)驗很重要的一點(diǎn)是要保持實(shí)驗的安全性、有效性及連續性。在實(shí)驗室的建設過(guò)程中,要確保水力、電力、動(dòng)力等的充足供應,同時(shí)要合理安置排污系統,便于實(shí)驗廢棄物及污染物的排放。

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