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    實(shí)驗室環(huán)境和人體表面微生物的檢查實(shí)驗

    1.  寫(xiě)標簽
    任何一個(gè)實(shí)驗,在動(dòng)手操作前均需shou先將器皿用記號筆做上記號,培養皿的記號一般寫(xiě)在皿底上。如果寫(xiě)在皿蓋上,同時(shí)觀(guān)察兩個(gè)以上培養皿的結果,打開(kāi)皿蓋時(shí),容易混淆。用記號筆寫(xiě)上班級、姓名、日期,本次實(shí)驗還要寫(xiě)上樣品來(lái)源(如實(shí)驗室空氣或無(wú)菌室空氣或頭發(fā)等),字盡量小些,寫(xiě)在皿底的一邊,不要寫(xiě)在當中,以免影響觀(guān)察結果。

    2.  實(shí)驗室細菌檢查

    (1)空氣將一個(gè)肉膏蛋白胨瓊脂平板放在當時(shí)做實(shí)驗的實(shí)驗室,移去皿蓋,使瓊脂培養基表面暴露在空氣中;將另一肉膏蛋白胨瓊脂平板放在無(wú)菌室或無(wú)人走動(dòng)的其他實(shí)驗室,移去皿蓋。一小時(shí)后蓋上兩個(gè)皿蓋。

    (2)實(shí)驗臺和門(mén)的旋鈕

    ①用記號筆在皿底外面中央畫(huà)一直線(xiàn),再在此線(xiàn)中間處畫(huà)一垂直線(xiàn)。

    ②取棉簽左手拿含有棉簽的試管,在火焰旁用右手的手掌邊緣和小指、無(wú)名指夾持棉塞(或試管帽),將其取出,將管口很快地通過(guò)煤氣燈(或酒精燈)的火焰,燒灼管口;輕輕地傾斜試管,用右手的拇指和食指將棉簽小心地取出。放回棉塞(或試管帽),并將空試管放在試管架上。

    ③弄濕棉簽左手取滅菌水試管,如上法拔出棉塞(或試管帽)并燒灼管口,將棉簽插入水中,再提出水面,在管壁上擠壓一下以除去過(guò)多的水分,小心將棉簽取出,燒灼管口,放回棉塞(或試管帽),并將滅菌水試管放在試管架上。

    ④取樣將濕棉簽在實(shí)驗臺面或門(mén)旋鈕上擦拭約2平方厘米的范圍。
     
    ⑤接種,A在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿開(kāi)啟成一縫。再將棉簽伸入,在瓊脂表面頂端接種(滾動(dòng)一下),立即閉合皿蓋。將原放棉簽的空試管拔出棉塞(或試管帽),燒灼管口,插入用過(guò)的棉簽,將試管放回試管架。

    ⑥劃線(xiàn)另取接種環(huán)在火焰上滅菌,先將環(huán)端燒熱,然后將接種環(huán)提起垂直放在火焰上,以使火焰接觸金屬絲的范圍廣一些,待接種環(huán)燒紅,再將接種環(huán)斜放,沿環(huán)向上,燒**可能碰到培養皿的部分,再移向環(huán)端,如此很快地來(lái)回通過(guò)火焰數次。

    左手拿起平板,同樣開(kāi)啟一縫,將滅過(guò)菌并冷卻了的接種環(huán)(可在瓊脂表面邊緣空白處試溫度,若發(fā)出濺潑聲,表示太燙),通過(guò)瓊脂頂端的接種區,向下劃線(xiàn),直到平板的一半處。注意:接種環(huán)與瓊脂表面的角度要小,移動(dòng)的壓力不能太大,否則會(huì )刺破瓊脂。

    閉合皿蓋,左手將平板向左轉動(dòng)**空白處,右手拿的接種環(huán)再在火焰上燒灼,使冷。接種環(huán)通過(guò)前面劃的線(xiàn)條再在瓊脂的另一半,從上向下來(lái)回劃線(xiàn)**1/2處。

    燒灼接種環(huán),轉動(dòng)平板,劃**后1/4,立刻蓋上皿蓋,燒灼接種環(huán),放回原處。整個(gè)劃線(xiàn)操作均要求無(wú)菌操作,即靠近火焰,而且動(dòng)作要快。

    3.  人體細菌的檢查

    (1)手指(洗手前與洗手后)

    ①分別在兩個(gè)瓊脂平板上標明洗手前與洗手后(當然,班級、姓名、日期各項在每次寫(xiě)標簽時(shí)是必不可少的)。

    ②移去皿蓋,將未洗過(guò)的手指在瓊脂平板的表面,輕輕地來(lái)回劃線(xiàn),蓋上皿蓋。

    ③用肥皂和刷子,用力刷手,在流水中沖洗干凈,干燥后,在另一瓊脂平板表面來(lái)回移動(dòng),蓋上皿蓋。

    (2)頭發(fā):在揭開(kāi)皿蓋的瓊脂平板的上方,用手將頭發(fā)用力搖動(dòng)數次,使細菌降落到瓊脂平板表面,然后蓋上皿蓋。

    (3)咳嗽:將去蓋瓊脂平板放在離口約6~8 cm 處,對著(zhù)瓊脂表面用力咳嗽,然后蓋上皿蓋。

    (4)鼻腔

    ①按照實(shí)驗臺檢查法的步驟②和③,取出棉簽,并將其弄濕。

    ②用濕棉簽在鼻腔內滾動(dòng)數次。

    ③按實(shí)驗臺檢查法的步驟④和⑤,接種與劃線(xiàn),然后蓋上皿蓋。

    4.  將所有的瓊脂平板翻轉,使皿底在上,放37℃培養箱,培養1~2天。

    5.  結果記錄方法

    (1)菌落計數在劃線(xiàn)的平板上,如果菌落很多而重疊,則數平板**后1/4面積內的菌落數。不是劃線(xiàn)的平板,也一分為四,數1/4面積的菌落數。

    (2)根據菌落大小、形狀、高度、干濕等特征觀(guān)察不同的菌落類(lèi)型。但要注意,如果細菌數量太多,會(huì )使很多菌落生長(cháng)在一起,或者限制了菌落生長(cháng)而變得很小,因而外觀(guān)不典型,故觀(guān)察菌落的特點(diǎn)時(shí),要選擇分離得很開(kāi)的單個(gè)菌落。

    菌落特征描寫(xiě)方法如下:

    ①大小大、中、小、針尖狀??上葘⒄麄€(gè)平板上的菌落粗略觀(guān)察一下,再決定大、中、小的標準,或由教師指出一個(gè)大小范圍。

    ②顏色黃色、金黃色、灰色、乳白色、紅色、粉紅色等。

    ③干濕情況干燥、濕潤、粘稠。

    ④形態(tài)圓形、不規則等。

    ⑤高度扁平、隆起、凹下。

    ⑥透明程度透明、半透明、不透明。

    ⑦邊緣整齊、不整齊。

    6.  結果

    (1)將你自己的平板結果記錄于下表中。
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