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    超凈工作臺在獼猴桃組織培養繁殖與工廠(chǎng)化育苗實(shí)驗中的應用

     

    植物組織具有無(wú)限增殖和產(chǎn)生不定芽、不定根的能力。在培養條件適宜時(shí),用一個(gè)芽可以培養出許多植株來(lái)。其在保持優(yōu)良砧木及品種種性、進(jìn)行工廠(chǎng)化育苗方面具有很好的意義。其方法步驟如下。

     

        一、外植體接種與材料消毒

        取田間當年生新梢或一年生枝蔓,去葉,用肥皂水將表面刷洗,并用自來(lái)水沖洗干凈,剪成一芽一段,放入干凈燒杯,拿進(jìn)超凈工作臺;先用70%酒精過(guò)一下,無(wú)菌水(用高壓鍋,在120℃下,滅菌30分鐘的水)沖洗3遍;再用0.1%升汞液消毒5~10分鐘,無(wú)菌水沖洗3遍;然后用酒精燈火焰消毒過(guò)的工具(鑷子、剪刀、撥針、解剖刀等)剝去鱗片、葉柄,取出帶數個(gè)葉原基的幼芽接入培養基,半包埋。

     

        培養基配好后裝入廣口的罐頭瓶、三角瓶或試管,裝入量為1~2厘米高。120℃滅菌30分鐘后備用。

     

        外植體接種后放到培養室的培養架上培養。培養條件為:光照1000勒克斯,8~10個(gè)小時(shí),暗14~16小時(shí);溫度25~28℃。培養1~2周,即可看出是否消毒徹底,有無(wú)感染。及時(shí)檢查,將未感染的外植體轉接到新的培養瓶?jì)?,丟棄已感染的外植體。

     

        二、繼代繁殖

        上述接入的外植體培養1~2個(gè)月,即可長(cháng)到2~3厘米長(cháng)。在超凈工作臺上,將其剪成約1厘米長(cháng)莖段,接種到新的培養基中(培養基的配方同上)。剪莖段時(shí)所用工具和培養皿(或牛皮紙)都要經(jīng)過(guò)消毒,消毒方法分別同上述酒精燈消毒法和高壓消毒法。

     

        其后,大約每25天左右進(jìn)行一次繼代培養。每次的莖段增殖量約為3~4倍。反復進(jìn)行,直到所需數量。

     

        三、生根

        上述培養的莖段長(cháng)到2厘米以上時(shí),即可用于生根。生根培養基的成分為上述培養基的大量元素減半,除激素和蔗糖外,其他成分不變。

     

        生根培養基配好后也需高壓滅菌(120℃,30分鐘)后使用。

     

        生根培養20天左右,莖段上即可長(cháng)出根,成為完整苗。生根苗長(cháng)到3~5厘米長(cháng)時(shí)即可鍛煉、移栽。

     

        四、生根苗的鍛煉、移栽

        (一)鍛煉

     

        組培苗在人工培養條件下長(cháng)期生長(cháng),對自然生長(cháng)環(huán)境的適應性減弱。移栽前需要一個(gè)過(guò)渡階段,即鍛煉。鍛煉方法為:將培養瓶移**自然光照下2~3天,打開(kāi)瓶口2~3天,再移栽。

     

        (二)移栽

     

        移栽時(shí)先洗凈根上培養基,避免培養基感染雜菌致苗死亡。移栽方法及灌水、遮陽(yáng)等管理同實(shí)生苗移栽。但注意組培苗比較嬌嫩,需輕盈操作。

     

        五、工廠(chǎng)化育苗

     

    將上述培養基制備及超凈工作臺相關(guān)、裝瓶、消毒、無(wú)菌苗增殖、生根、鍛煉、移栽等過(guò)程全部放在實(shí)驗室和溫室中進(jìn)行,即為工廠(chǎng)化育苗。目前,這樣的生產(chǎn)線(xiàn)已在意大利和法G投入使用。但外植體接種尚需人工操作。

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